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抗精子抗体一般如何进行检验呢

来源:南昌华山不孕不育专科医院发布时间:2012年05月16日免费热线:400-6013-130

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南昌不孕不育医院专家介绍说,男性不育的原因也有多种,而约有2%-10%的不育症是由于免疫因素所引起的。一般来说,免疫性不育的出现主要有三种情况,即男性的自体免疫、女性的抗精子循环抗体和抗精子组织抗体。

抗精子抗体一般如何进行检验呢?

1、精子抗原制备:筛选收集精液常规检查正常的精液,用生理盐水反复离心洗涤,尽可能除去精浆,经超声波超声粉碎,10~15min高速离心,吸上清,测定上清液蛋白浓度,将蛋白浓度稀释为3.5~5.0μg/mL,为精子抗原溶液。

2、反应板包被抗原:将人精子抗原稀释成3.5~5μg/mL,包被液加到聚氯乙烯微量测定板内,每孔100μL,置4℃冰箱过夜。

3、封闭处理:次日早晨,倾去抗原溶液,用洗涤PBS洗3次,每次5min,每次洗涤后都要将板在纸上拍干,再加入1%的聚乙烯醇溶液200μL封闭,置室温1小时后同上法洗涤。

4、加待测样品:样品用PBS稀释100倍,每孔加入100μL,同时加As-Ab血清及正常处女血清作分别阳性和阴性对照,置37℃温育1h,同上法洗涤。

5、加酶结合物:HRP-ProteinA以1∶640稀释,每孔加入100μL,置室温1h,同上洗涤。

6、酶反应:加新鲜配制的OPD底物溶液,每孔加入50μL,置室温暗处10min,再加10%H2SO4终止液每孔50μL。

7、结果判定:用酶标测定仪490μm测其OD值,OD值≥2.0时为阳性。

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南昌不孕不育症专家指出,临床研究表明。25%-30%的不育症病人的抗精子抗体试验呈阳性,由此可此,抗精子抗体对于生育的重大影响,是造成免疫性不育的主要原因。但需要注意的是,抗精子抗体的产生并没有什么明显的症状,只有通过通过检查才能确诊,因此,对于免疫性不育患者来说,检查就显得尤为重要。
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